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渦漩混勻器使用的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
渦漩混勻器主要適用于醫(yī)學(xué)、生物工程、化學(xué)、醫(yī)藥等研究領(lǐng)域,是生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)各種試劑、溶液、化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行固定、振蕩、混勻處理的必備常規(guī)儀器,那么對(duì)于渦漩混勻器我們?cè)撊绾握_使用呢?
渦漩混勻器在生物學(xué)中的分子生物學(xué)中,我們經(jīng)常要做細(xì)胞質(zhì)粒DNA的提取和檢測(cè)的試驗(yàn),以便可以獲得DNA樣本,或者用于電泳檢測(cè)分析,了解樣品中是否含有質(zhì)粒DNA,并判斷分子量的大小等等,因此,質(zhì)粒DNA的提取是基因工程實(shí)驗(yàn)中最常用的手段之一。
下面先為大家什么是質(zhì)粒,質(zhì)粒存在于許多細(xì)菌以及酵母菌等生物中,是細(xì)胞染色體外能夠自主復(fù)制的很小的環(huán)狀DNA分子。質(zhì)粒是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳銀子,大小從1kb到200kb不等,大多數(shù)來自細(xì)菌的質(zhì)粒是雙鏈、共價(jià)閉合環(huán)狀的分子,并以超螺旋形式存在于宿主的細(xì)胞質(zhì)中。它是細(xì)菌內(nèi)的共生型遺傳因子,主要發(fā)現(xiàn)于細(xì)菌、放線菌和真菌細(xì)胞中,質(zhì)粒具有自主復(fù)制和轉(zhuǎn)錄能力,能在子代細(xì)胞中保持恒定的拷貝數(shù),并表達(dá)所攜帶的遺傳信息。
質(zhì)粒的分離是利用質(zhì)粒DNA和染色體DNA在變性與復(fù)性中的差異來達(dá)到的目的。當(dāng)菌體在NaOH和SDS溶液中裂解時(shí),蛋白質(zhì)與DNA發(fā)生變性,由于染色體DNA與質(zhì)粒DNA拓?fù)錁?gòu)型不同,染色體DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)解開,而共價(jià)閉合質(zhì)粒DNA的氫鍵雖被斷裂,但兩條互補(bǔ)鏈彼此相互盤繞仍會(huì)緊密地結(jié)合在儀器。當(dāng)加入中和液后,溶液pH恢復(fù)至中性,在高鹽濃度的情況下,染色體DNA之間交聯(lián)形成不溶性網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)并與蛋白質(zhì)SDS復(fù)合物等形成沉淀;不同的是質(zhì)粒DNA復(fù)性迅速而準(zhǔn)確,保持可溶狀態(tài)而留在上清中。這樣,通過離心可沉淀大部分細(xì)胞碎片、染色體DNA、RNA及蛋白質(zhì)。除去沉淀后上清中的質(zhì)??捎梅勇确鲁樘徇M(jìn)一步純化質(zhì)粒DNA。
提取質(zhì)粒DNA最常見的方法是堿裂解法,具體步驟如下:首先講含有質(zhì)粒的細(xì)菌接種到培養(yǎng)基,經(jīng)過大約12小時(shí)的恒溫?fù)u陪后棄去上清液,加入中和液后用渦漩混勻器將溶液充分混勻,然后加入堿液進(jìn)行沉淀,這就是變性與復(fù)性,最后的操作就是實(shí)驗(yàn)室常用的沉淀的分離、純化。分離、純化DNA首先取上清液,加入分離液后采用渦漩混勻器混勻溶液,離心取上清液,加入無(wú)水乙醇后混勻,離心后棄上清液,干燥DNA即可。
在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中,我們需要用到渦漩混勻器進(jìn)行溶液混勻,本公司生產(chǎn)的渦漩混勻器可滿足每一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的需要和安全標(biāo)準(zhǔn),該渦漩混勻器帶有光電感應(yīng),檢測(cè)到儀器上方有手靠近,儀器即自動(dòng)開始震動(dòng)混勻,不需要施加任何外力,震動(dòng)速度可調(diào),時(shí)間可設(shè),有“光電感應(yīng)”、“連續(xù)”兩種安全操作模式可選擇,渦漩混勻器穩(wěn)定性高,非常適合細(xì)胞質(zhì)粒提取實(shí)驗(yàn)。
渦漩混勻器的使用方法:
在使用渦漩混勻器前,請(qǐng)先檢查整機(jī)配件是否齊全。打開電源開關(guān),即開始工作,工作時(shí)根據(jù)你手中的壓力輕重,試管中的溶液均勻便能快能慢。使用試管和比色管,最好需混勻的溶液不超過試管的二分之一為最佳,需要均勻溶液較多時(shí),請(qǐng)用三角瓶。為確保安全,使用結(jié)束時(shí),請(qǐng)關(guān)閉電源,渦漩混勻器應(yīng)保持清潔干燥,嚴(yán)禁溶液進(jìn)入機(jī)內(nèi),以免損壞機(jī)件。
渦漩混勻器的使用注意事項(xiàng):
使用該儀器時(shí)應(yīng)放在較平滑的平面或者玻璃臺(tái)面上。
如果開啟電源開關(guān)后,電機(jī)若是無(wú)響應(yīng),應(yīng)先檢查插頭接觸是否良好,保險(xiǎn)絲是否燒斷(應(yīng)斷電進(jìn)行)。
為了使渦漩混勻器工作時(shí)平衡性能好,避免產(chǎn)生較大振動(dòng),裝瓶時(shí)應(yīng)將所有試瓶分布均勻,各瓶的容液應(yīng)大致相等。
接通電源,打開電源開關(guān),指示燈亮,再對(duì)機(jī)器進(jìn)行調(diào)速后,再按啟動(dòng)按鈕,儀器啟動(dòng)完畢。
本儀器使用結(jié)束后要注意妥善保管,應(yīng)放在干燥、通風(fēng)、無(wú)腐蝕性氣體的地方,使用中切勿使液體流入機(jī)芯,以免損壞器件。
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